Development of an Analytical Method for Ligand Quantification in Pharmaceutical Forms Using Visible Range Molecular Absorption Spectroscopy

الملخص

يتناول البحث تقدير الليجاندات سواء كمواد أولية أو في المستحضرات الصيدلانية، حيث يتضمن تطوير طريقة تحليلية طيفية حساسة وفعّالة من حيث التكلفة وذات خصوصية عالية. تعتمد التقنية المقترحة على آلية الإحلال النوكليوفيلي لتكوين معقد برتقالي-أحمر يظهر امتصاصًا مميزًا عند طول موجي 450 نانومتر. تم دراسة الظروف التجريبية المثلى للتفاعل، حيث وُجد أن أفضل الظروف تتحقق باستخدام 1.4 مل من الكاشف بتركيز 2.2% وزن/حجم، مع استخدام الميثانول كمذيب، والتسخين في حمام مائي عند 90°م لمدة 22 دقيقة. كما تمت دراسة ثباتية الناتج ونسبة المتفاعلات المشاركة في تكوينه باستخدام طريقة "جوب" وطريقة النسبة المولارية. أظهرت النتائج أن المعقد الناتج مستقر لمدة تصل إلى ساعتين، وأن نسبة التفاعل هي (1:1) بين الكاشف والليجاند. جرى تقييم الطريقة التحليلية وفقًا لمتطلبات ICH تحت ظروف التفاعل المثلى. وقد تم تطبيق قانون لامبرت-بير ضمن مدى تراكيز (30–110 ميكرومول) مع معامل ارتباط R=0.99 وقيم استرجاع تراوحت بين 99.39–99.59%. استُخدمت الطريقة بنجاح في تقدير الليجاند في الأقراص الدوائية، حيث لم يلاحظ أي تداخل من المواد المضافة الداخلة في تركيب هذه المستحضرات أو من عقار الميتفورمين الموجود في بعض الأشكال الصيدلانية المشاركة. كما تبين عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية عند مقارنة النتائج مع نتائج الفحص باستخدام طريقتي HPLC و UV-Vis من حيث اختبار t واختبار F. وأظهرت نتائج الارتباط الجزيئي للمركب Gliclazide بطاقة ارتباط –7.7 كيلوكالوري/مول، مما يدل على قدرة المركب على تثبيط إنزيم UNC، وهو ما يعد واعدًا في تثبيط وعلاج التهابات ضرع الأبقار، وبالتالي المساهمة في تحقيق أعلى مستويات ممكنة من إنتاج الحليب.